1. 單波長單光束分光光度計是一類結構簡單，使用、維護比較方便，應用廣泛的分光光度計。其設計原理和結構具有以下特點：①單光束光路，從光源到試樣至接收器只有一個光通道，使用中依次對參考樣品和待測試樣進行測定，然后將二次測定數據進行比較、計算，獲得終結果；②儀器只有一個色散元件，工作波長范圍較窄；③通常采用直接接收放大顯示的簡單電子系統，用電表或數字顯示；④結構簡單、附件少、功能范圍小，不能做特殊試樣如渾濁樣品、不透明樣品等的測定。

 

2.單光束分光光度計檢測的準確性不夠穩定，不能用于精密分析。雙光束分光光度計的光路設計在其出射狹縫和樣品吸收池之間增加了一個光束分裂器或斬波器，作用是以一定的頻率將一個光束交替分成兩路，使一路經過參比溶液，另一路經過樣品溶液，然后由一個檢測器交替接收或由兩個匹配器分別接收兩路信號。這是目前國內外使用多，性能較為完善的一類分光光度計。原理和結構特點：①從光源到檢測器有試樣光路和參考光路兩條通路，可同時對檢測樣品和參考樣品進行測定，直接獲得檢測數據，還可自動補償檢測時因條件的隨機變化（如溫度變化、電源電壓波動、放大器增益變化、儀器掃描、記錄系統的間隙變化等）或樣品中非測定組分的干擾所引起的影響，比單光束分光光度計使用更方便、準確；②一般采用兩個光柵或棱鏡加光柵的雙單色器，能有效地提高分辨率和降低雜散光；③可以自動進行波長掃描、自動記錄光譜曲線，也可以外接計算機，實現自動化運行；④可裝備各種附件，光、電、機緊密結合，功能范圍寬。

 

3.雙波長分光光度計能較好的解決由于非特征吸收信號（如試樣的渾濁、吸收池與空氣界面以及吸收池與溶液界面的折射差別等）影響而帶來的誤差。其基本原理是從同一光源發出的光分為兩束，分別經兩個單色器分光后得到兩束不同波長（λ1，λ2）的單色光，經斬光器使兩束光以一定頻率交替照射同一樣品，然后經過檢測器顯示出兩個波長下的吸光度差值（ΔA=Aλ1-Aλ2）。

 

只要λ1、λ2選擇適當（被測物在一個波長上有大吸收峰，在另一個波長上沒有吸收或很少吸收；而非被測物在兩個波長上的吸收是相同的），ΔA就是消除了非特征性吸收干擾（即扣除了背景吸收）的吸光度值。這樣即可自動扣除背景的影響。雙波長分光光度計不用參比溶液，只用一個待測溶液，大大提高了檢測的準確度。